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酶標分析儀免疫吸附試驗的基本操作原理
作者：admin 時間：2021-06-29 01:39:06 點擊次數(shù):1186
酶標分析儀是目前應(yīng)用非常廣泛的醫(yī)療設(shè)備。下面山東萊恩德公司小編就酶標分析儀免疫吸附試驗的基本操作原理如下:
1、先將多余的特異性抗體(或抗原)涂在載體(酶標板)上，通過抗原-抗體反應(yīng)使副物質(zhì)(抗原或抗體)和酶標(用hrp -辣根過氧化物)。酶標抗體或抗原)也與載體結(jié)合(固相分離)。洗去游離酶標簽后，添加底物。與載體結(jié)合的標記酶促進了底物的顏色。*后，利用光電比色法對測試對象進行定性判斷或定量測定。上述方法的靈敏度可達ng/ml水平。
2、包覆ELISA板:在ELISA板孔中加入特異性抗原溶液，4℃過夜。然后洗3到5次,清洗解決方案(檔板洗板),以便解決方案是堅定的特異抗原吸附表面的微量滴定板的微量滴定板,形成固相抗原和殘余液體雜質(zhì)沖走。
3、將待測樣品溶液(患者血清)加入酶標儀:如果樣品溶液中含有待測抗體，經(jīng)孵育反應(yīng)后，會與被包被抗原特異性結(jié)合，產(chǎn)生被包被抗原與待測抗體的結(jié)合物。配合物被吸附在微量滴定板的微孔表面。然后再次清洗，以清除殘留的液體和干擾物質(zhì)。
4、添加酶偶聯(lián)物:孵育反應(yīng)后，形成包被抗原+試驗抗體+酶標記抗原的三組分復(fù)合物，也吸附在微孔表面，再進行洗滌，去除游離或非特異性酶偶聯(lián)物(洗盤)污漬。
5、加顯色液:顯色反應(yīng)10分鐘至20分鐘后，被吸附絡(luò)合物中的酶與顯色底物溶液形成顯色液。此時，由于游離或非特異性吸附的酶已被去除，溶液的顏色僅取決于已與被分析物結(jié)合的酶的數(shù)量，所以它能真實反映被分析物的濃度。酶凝固的越多，顏色就越深，這意味著被分析物的濃度就越大。
6、加停止液:停止顯色反應(yīng)。
酶標分析儀檢測:將顯色的酶標板放在酶標儀上進行光電比色檢測。該儀器檢測空白孔、陰性和陽性對照孔、標準孔、質(zhì)控孔和患者樣品孔的吸光度。值，并根據(jù)程序要求自動計算患者樣本中分析物的濃度或進行定性分析。
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