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酶標(biāo)儀酶免分析七大步驟

作者:酶標(biāo)儀    時(shí)間:2022-07-28 11:04:14    點(diǎn)擊次數(shù):723
 

    酶標(biāo)儀酶免分析七大步驟:

酶標(biāo)儀

    1、將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品對(duì)應(yīng)的微孔編號(hào),每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品做雙孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置。


    2、在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入50l各標(biāo)準(zhǔn)品溶液,酶標(biāo)儀在各樣品孔中加入50l樣品溶液。


    3、在所有孔中加入50l的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光反應(yīng)30分鐘。


    4、小心揭開(kāi)蓋板膜,甩干孔中液體,用稀釋好的洗滌液(250μl/孔)充分洗滌微孔板3次,在吸水紙上拍干(拍干后未清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。


    5、酶標(biāo)儀在所有孔中加入100l的酶標(biāo)二抗,酶標(biāo)儀用蓋板膜封板,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光反應(yīng)30分鐘。取出酶標(biāo)板,按步驟4洗板5次。


    6、洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50l底物液A,再加50l底物液B,輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之徹底混勻,25℃環(huán)境避光顯色15分鐘(在顏色淺的情況下可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,但總顯色時(shí)間不要超過(guò)30分鐘)。


    7、每孔中加入50l終止液,輕輕晃動(dòng)使之徹底混勻,在450nm(建議使用雙波長(zhǎng)450/630nm)下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5分鐘內(nèi)讀取。


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